Aglutinación de inmunoglobulinas de yema de huevo de gallina (IgY) contra Salmonella enterica serovariedad Enteritidis / Agglutination of chicken egg yolk immunoglobulins (IgY) against Salmonella enterica serovar Enteriditis

Para producir extractos de IgY se emplearon dos lotes de 6 gallinas ponedoras cada uno. En el lote vacunado (V) las aves se inocularon por vía intramuscular con dos dosis de una bacterina contra Salmonella enterica serovariedad Enteritidis. En el lote testigo (T) las aves no se vacunaron. Con las yemas de ambos lotes se efectuaron 4 extracciones de IgY. Las dos primeras se realizaron con las yemas de los huevos producidos durante la 4§ y 5§ semana post-vacunación (extractos 1V y 1T) y las otras dos con las de la 6§, 7§ y 8§ semana (2V y 2T). Los extractos 1V y 1T se congelaton y descongelaron (1V-A y 1T-A) y se concentraron por diálisis simple (1V-B y 1T-B) o doble (1V-C y 1T-C). Mediante una prueba de ELISA para detectar antígenos flagelares de S. Enteritidis, los extractos V fueron positivos y los T negativos. El extracto 1V-C fue el más positivo y se seleccionó para realizar las aglutinaciones. Este extracto contenía 1,9 g/dl de proteínas totales y presentó bandas electroforéticas características de IgY. El extracto 1T-C fue usado como control negativo de aglutinación. Emplenado ambos extractos IgY y antisueros policlonales de conejo (IgG) se efectuaron aglutinaciones somáticas en placa y flagelares en tubo. Se estudiaron 357 cepas de S. enterica, 10 cepas de diferentes especies de la familia Enterobacteriaceae y dos cepas de la familia Vibrionaceae. El extracto 1V-C aglutinó a distintas cepas de Salmonella con estructura antigénica somática o flagelar relacionada con la cepa vacunal, mientras que las salmonelas con antígenos diferentes y otras especies de la familia Enterobacteriaceae y Vibrionaceae fueron negativas. Este trabajo demuestra que es posible emplear las IgY para identificar serovariedades de S. enterica

Evaluación de medios de cultivo selectivos para el aislamiento de Salmonella en producción avícola / Evaluation of selective culture media for isolation of Salmonella from poultry

Se evaluó el desempeño de los medios agar Rambach, agar xilosa-lisina-desoxicolato (XLD) con el agregado de diferentes concentraciones de tergitol tipo 4 o sulfato de sodio y de 7-etil-2-metil-4-undecanol (XLDT4), agar Salmonella-Shigella (SS) y agar sulfito de bismuto según Wilson-Blair (SB) utilizando serovariedades de Salmonella spp. y otras especies bacterianas de la flora intestinal de las aves. Los medios de cultivo selectivos fueron evaluados mediante recuento de bacterias viables, comparando estos resultados con los del agar base Columbia (ABC) adicionado con sangre bovina al 7 por ciento, para lo cual se emplearon las serovariedades de Salmonella spp. que con mayor frecuencia se aíslan en las aves de nuestro país. Además se analizaron muestras provenientes de pollos experimentalmente inoculados con distintas serovariedades de Salmonella. Los medios Rambach, SS y XLD o XLDT4 son adecuados para el aislamiento de salmonelas. En cambio el agar SB fue muy inhibidor para las salmonelas de interés veterinario. El agregado de novobiocina o tergitol al medio XLD no inhibio completamente a todas las cepas de Proteus. En el agar Rambach comercial no creció ninguna de las cepas de Proteus que habían desarrollado en los otros medios. Diversas bacterias contaminantes produjeron colonias similares a Salmonella en los agares Rambach, SS, XLD y XLDT4. Dado que las especies bacterianas contaminantes que desarrollan en los medios de cultivo son diferentes, es recomendable optimizar el diagnóstico sembrando las muestras en los agares SS, XLD o XLDT4 y simultáneamente también en agar Rambach

Evaluación de drogas antimicrobianas y atmósferas para el aislamiento de Campylobacter fetus subspp. del tracto genital bovino / [Evaluation of antimicrobial drugs and atmospheres for the isolation of Campylobacter fetus subspp. from the bovine genital tract]

Growth of 3 reference bovine C. fetus strains in media with and without antibiotics and bacteriostats active against the most common contaminant bacteria in the bovine genital tract was evaluated. In addition, 2 regional bovine C. fetus strains and 1 reference C. sputorum biovar bubulus strain were used in some experiments. Reference strain C. fetus subsp. venerealis was completely inhibited by polymyxin (> or = 0.25 IU/ml) whereas the other C. fetus strains were not inhibited. In Shepler’s medium supplemented with rifampicin (10 micrograms/ml) subsp. fetus, was the only one to grow. When rifampicin was used at 5 micrograms/ml together with a reduced dose of the other Shepler’s antibiotics, especially polymyxin B (0.85 IU/ml), subsp. venerealis was able to grow; nevertheless even at such a reduced dose, rifampicin was inhibitory for the biotype intermedius. It was demonstrated that triclosan (Irgasan) could be very useful at or = 50 micrograms/ml. C. sputorum biovar. bubulus was less inhibited than C. fetus with triclosan grew up to more than 100 micrograms/ml, with 5-fluorouracil up to 100 micrograms/ml and with fosfomycin up to 50 micrograms/ml. Growth of C. fetus subspp. was compared in different microaerophilic atmospheres contained in anaerobic jars (Oxoid HP 11) without palladium catalyzer. Growth with nitrogen or hydrogen was similar. When jars were replaced by 15 x 13 cm cylindrical cans without valves or gas measurement devices only pure hydrogen supported satisfactory growth of all C. fetus subspp. and C. sputorum biovar. bubulus strains. The candle system, a commercial nitrogen rich gas mixture and pure carbonic anhydride prepared in these cans failed to enable these strains to grow. C. fetus subsp. fetus was more aero-tolerant than subsp. venerealis and its biotype intermedius and was able to grow, although very weakly, with only carbonic anhydride added to an aerobic atmosphere. The growth obtained using a commercial gas generating microaerophilic kit (Oxoid BR-56) was comparable to the one achieved with the hydrogen rich atmosphere prepared in our laboratory.

Evaluación de drogas antimicrobianas y atmósferas para el aislamiento de Campylobacter fetus subspp. del tracto genital bovino / [Evaluation of antimicrobial drugs and atmospheres for the isolation of Campylobacter fetus subspp. from the bovine genital tract]

Growth of 3 reference bovine C. fetus strains in media with and without antibiotics and bacteriostats active against the most common contaminant bacteria in the bovine genital tract was evaluated. In addition, 2 regional bovine C. fetus strains and 1 reference C. sputorum biovar bubulus strain were used in some experiments. Reference strain C. fetus subsp. venerealis was completely inhibited by polymyxin (> or = 0.25 IU/ml) whereas the other C. fetus strains were not inhibited. In Shepler’s medium supplemented with rifampicin (10 micrograms/ml) subsp. fetus, was the only one to grow. When rifampicin was used at 5 micrograms/ml together with a reduced dose of the other Shepler’s antibiotics, especially polymyxin B (0.85 IU/ml), subsp. venerealis was able to grow; nevertheless even at such a reduced dose, rifampicin was inhibitory for the biotype intermedius. It was demonstrated that triclosan (Irgasan) could be very useful at or = 50 micrograms/ml. C. sputorum biovar. bubulus was less inhibited than C. fetus with triclosan grew up to more than 100 micrograms/ml, with 5-fluorouracil up to 100 micrograms/ml and with fosfomycin up to 50 micrograms/ml. Growth of C. fetus subspp. was compared in different microaerophilic atmospheres contained in anaerobic jars (Oxoid HP 11) without palladium catalyzer. Growth with nitrogen or hydrogen was similar. When jars were replaced by 15 x 13 cm cylindrical cans without valves or gas measurement devices only pure hydrogen supported satisfactory growth of all C. fetus subspp. and C. sputorum biovar. bubulus strains. The candle system, a commercial nitrogen rich gas mixture and pure carbonic anhydride prepared in these cans failed to enable these strains to grow. C. fetus subsp. fetus was more aero-tolerant than subsp. venerealis and its biotype intermedius and was able to grow, although very weakly, with only carbonic anhydride added to an aerobic atmosphere. The growth obtained using a commercial gas generating microaerophilic kit (Oxoid BR-56) was comparable to the one achieved with the hydrogen rich atmosphere prepared in our laboratory.

Mycrobiology of diarrhoea in young beef and dairy calves in Argentina

Rotavirus, Cryptosporidium sp. y Salmonella spp. fueron investigados en las heces de 452 terneros diarreicos provenientes de 36 rodeos de cría y 33 de tambo. Los animales muestreados tenían desde pocos días de vida hasta aproximadamente 1 mes de edad. Escherichia coli enterotoxigénica (ETEC) fue buscada en 212 terneros de 15 o menos días de edad. Los animales provenían de las Provincias de Buenos Aires (59%) de los terneros), Córdoba (18%), Santa Fe (16%), Entre Ríos (5%) y la Pampa (2%). Um mínimo de 4 terneros fue muestreado en cada establecimiento. En terneros de cría, rotavirus fue excretado por el 45,1% de los animales Cryptosporidium por el 30,5% y Salmonela serovariedades Arechabaleta, Livingstone, Panama y Typhimurium por el 1,9% (Cuadro 1). En terneros de tambo Cryptossporidium fue excretado per el 29,6%, rotavirus por el 23% y Salmonella serovariedad Dublin por el 1,6%. ETEC no fue detectado en ningún ternero. Rotavirus fue el agente más difundido, detectado en 32(88,9%) rodeos de cría (Cuadro 2) y excretado por más del 50% de los terneros en la mitad de esos rodeos. En contraste rotavirus fue solamente detectado en 19(57,5%) tambos y fue excretado por más del 50% de los terneros en 6 de esos rodeos. Se identificaron oocistos de Cryptosporidium en 27(75%) rodeos de cría y en 23(69,7%) tambos. La salmonelosis por la serovariedad Dublin se asoció con diarrea en 2 tambos. Infecciones concurrentes con dos o tres agentes ocurrieron en 36(8%) terneros y en 38(55,1%) establecimientos; la combinación rotavirus-Cryptosporidium se encontró en 31(6,9%) terneros y en 33(47,8) establecimientos

Indentification of Campylobacters from bovine and ovine faeces

Para buscar y seleccionar métodos simples que puedan ser de utilidad para la diferenciación de las diversas especies del género Campylobacter se estudiaron 497 aislamientos bovinos y 51 ovinos, obtenidos de heces recolectadas de animales diarreicos y sanos, en Escocia y el norte de Inglaterra, (40, 46) y se los comparó con cepas provenientes de otros orígenes y especies animales. Estos aislamientos se dividieron en 3 grupos: 1) Grupo C. jejuni - C. cocli (295 aislamientos bovinos y 36 ovinos): fueron catalasa positivos, colonias con brillo metálico que difundieron en el agar, células pequeñas y delgadas con longitud de onda corta y amplitud reducida (18), con transformación cocoide (18) rápida, sensibles al ácido nalidíxico (Nal) (39) y resistentes a la cefalotina (Cep) (19). 2) Grupo C. hyointestinalis - C. fetus (202 aislamientos bovinos): fueron catalasa positivos, colonias con poca o ninguna difusión en el agar, células grandes y gruesas con longitud de onda larga y amplitud marcada, transformación cocoide negativa, casi siempre sensibles a la Cep y resistentes al Nal. 3) Grupo C. fecalis - C. sputorum subsp. bubulus (15 aislamientos ovinos): tuvieron variable catalasa y transformación cocoide, los cultivos fueron de consistencia adherente y pegajosa, las células pequeñas y en forma de coma, sensibles al Nal y a la Cep o bien no crecieron en el agar con el compuesto hierro-bisulfito-piruvato (FBP) (39) que se utilizó para las pruebas de sensibilidad. La reacción de hidrólisis del hipurato diferenció específicamente a C. jejuni (positivo) del resto de las especies. La zona de inhibición del Nal fue más angosta en el 44,1% de los aislamientos de C. jejuni que la obtida con 2 cepas humanas de referencia, señalando que las poblaciones de este Campylobacter sp. difieren en los rumiantes y en el hombre (cuadro 2)...